CCR2/β-Arrestin/CHO
CBP71394
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| I. Background | |
| CCR2（C-C 趨化因子受體 2 型）是表達(dá)于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞表面的 G 蛋 白偶聯(lián)受體（GPCR），具有七次跨膜螺旋結(jié)構(gòu)，胞外 N 端含有糖基化位點，胞內(nèi) C 端則 負(fù)責(zé)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白相互作用域。人 CCR2 蛋白由 374 個氨基酸構(gòu)成，具有兩個主要剪接 變體：CCR2A 和 CCR2B，其中 CCR2B 是最常見的功能型形式。 CCR2 的內(nèi)源性配體主要為 CCL2（MCP-1）。當(dāng) CCL2 結(jié)合 CCR2 后，通過激活 Gαi 信號通路觸發(fā)下游β-arrestin、MAPK 等級聯(lián)反應(yīng)，驅(qū)動免疫細(xì)胞向炎癥/損傷部位遷移；在 病理狀態(tài)下，CCR2/CCL2 軸過度激活會促進(jìn)單核細(xì)胞浸潤至組織（如脂肪肝、動脈粥樣斑 塊、腫瘤微環(huán)境），介導(dǎo)慢性炎癥與纖維化，因而成為治療代謝性疾病（NASH）、自身 免疫病、疼痛和癌癥轉(zhuǎn)移的熱門靶點。 |
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| II. Description | |
CCR2 β-Arrestin CHO 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) CCR2/β-Arrestin 的信號轉(zhuǎn) 導(dǎo)過程，原理見下圖所示。當(dāng)缺乏配體刺激時，β-Arrestin 不與 CCR2 結(jié)合，融合β-Arrestin 的熒光素酶處于失活構(gòu)象，當(dāng) CCR2 遭遇配體刺激時，融合熒光素酶報告基因的β-Arrestin 被招募，使熒光素酶報告基因處于激活狀態(tài)，加入其底物后發(fā)光信號增強。 Figure 1. CCR2 β-Arrestin CHO 細(xì)胞模型原理圖 |
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| III. Introduction | |
| Host Cell: |
CHO |
| Stability: | 20 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.) |
| Freeze Medium: | 90% FBS+10% DMSO |
| Culture Medium: | F12k+10%FBS+5μg/ml puromycin+5μg/ml blasticidin |
| Mycoplasma Status: | Negative |
| Storage: | Liquid nitrogen immediately upon delivery |
| Application(s): |
Functional assay for CCR2 |
| Transducer: | β-Arrestin |
| IV. Description of Host Cell Line | |
| Organism: | Hamster |
| Tissue: | Ovary |
| Morphology: | Epithelial |
| Growth Properties: | Adherent |
| V. Representative Data | |
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Figure 2. Recombinant CCR2/β-Arrestin/CHO constitutively expressing CCR2. |
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Figure 3. Dose response of Human CCL2 in CCR2 β-Arrestin CHO(C10). |
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Figure 4.Inhibition of hCCL2-induced β-Arrestin Recruitment By CCL2 Neutralization Ab in CCR2 β-Arrestin CHO(C10). Inhibition of hCCL2-induced β-Arrestin Recruitment in CCR2 β-Arrestin CHO(C10). |
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